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Bachelor thesis

Développement d'outils génétiques pour les travaux avec pediococcus damnosus

    2008

Mémoire de diplôme HES: Haute Ecole d'Ingénierie, 2008

French German Objectif: Construire un vecteur navette E. coli / P. damnosus avec une origine de réplication provenant de P. damnosus DSM 20331. Développer et établir une méthode de transformation de P. damnosus. Résultats: L’origine de réplication de Bacillus subtilis présente dans le vecteur navette à disposition a été supprimée. Un adaptateur a par la suite été inséré avec succès dans ce vecteur navette. Le plasmide rolling circle p60 a pu être amplifié par PCR avec deux paires d’amorces. Les produits PCR ont été intégrés dans le vecteur pGEM-T easy par clonage TA et ont ensuite été extraits par digestion. Plusieurs tentatives d’insertion du p60 dans le vecteur navette ont été réalisées sans succès. A chaque fois, les essais de transformation n’ont fourni que le pGEM-T easy religué. Une transformation a été effectuée avec le vecteur pGEM-T easy contenant l’insert p60. Cette expérience a échoué, car aucune colonie ne s’est formée. Ziel: Konstruktion eines E. coli / P. damnosus Pendelvektors mit einem Replikationsursprungs aus P. damnosus DSM 20331. Entwickeln und etablieren einer Transformationsmethode für P. damnosus. Resultate: Der Bacillus subtilis Replikationsursprung, der im Pendelvektor vorhanden war, wurde entfernt. Ein Adaptor wurde in der Folge in diesen Pendelvektor erfolgreich integriert. Das rolling circle Plasmid p60 konnte mittels PCR mit zwei Paaren von Primers amplifiziert werden. Die PCR Produkte konnten in den pGEM-T easy Vektor mittels TA Klonierung integriert werden und dann durch Verdauung herausgeschnitten werden. Mehrere Versuche das Plasmid p60 in den Pendelvektor einzufügen waren erfolglos. Die Transformationsversuche haben jedesmal nur den religierten pGEM-T easy geliefert. Eine Transformation wurde mit dem pGEM-T easy Vektor, der das Insert p60 enthält, ausgeführt. Dieses Experiment ist gescheitert, weil sich keine Kolonien gebildet haben.
Language
  • French
Classification
Biotechnology
Notes
  • Haute Ecole d'Ingénierie Valais
  • Technologies du vivant - Life Technologies
  • Biotechnologie
  • hesso:heivs
License
License undefined
Identifiers
  • RERO DOC 12825
Persistent URL
https://sonar.ch/hesso/documents/317533
Statistics

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